Kit de anticorpos de anticorpos de anticorpos de anticorpo de diarrea viral bovina

Especificación

 

Procedementos de proba e interpretación

 

Paso 1 Procedemento de proba

1.1 Preparación da solución de lavado

Wconcentración de orking wAshing Liquid:Antes do uso, a solución de lavado debe restaurarse á temperatura ambiente (20-25 graos) e axitarse uniformemente para facelo uniforme. A continuación, dilúese 20 veces a solución de lavado concentrado con auga purificada (por exemplo, engádese unha solución de lavado concentrada de 5 ml a auga purificada de 95 ml), mestura ben e o líquido de lavado diluído pódese almacenar en 2-8 graos durante 7 días.

1.2 Preparación da mostra

① Tomouse sangue de animais enteiros, centrifugado a 4000 rpm durante 10 minutos e recolléronse sobrenadante. O soro tamén se pode coagulado de forma natural sen hemólise.

② Dilúe a mostra de soro 1:50 (engade 3UL sérico a 147UL Diluent de mostra) e mestura a fondo.

Nota: Os controis negativos e positivos tamén precisan diluír.

1.3 Preparación conxugada enzimática

Diluír o conxugado enzimático 1: 250 (engade conjugado enzimático 2UL (x100) a 498ul de diluente de mostra) e mestura a fondo.

1.4 Procedemento de proba

① Toma a microplaca de etiqueta encima (segundo o número de mostras, pódese desmontar e usarse varias veces), engadir 100ul do soro diluído á microplaca de etiqueta enzima, establecer dous pozos cada un para mostras negativas e positivas e engadir 100ul cada un para controis negativos e positivos á reacción ben respectivamente. Sacude suavemente a mostra no pozo, empregando a película de placa de selado para cubrir a placa e incubar aos 37 graos durante 30 minutos.

② Apen a película de placa de selado, axita a solución na placa ben, engade 300 µL de lavado de concentración de traballo a cada pozo e logo descarta o líquido no pozo. Repita os pasos anteriores 5 veces e, finalmente, seca nun papel absorbente limpo.

③ADD 100 µl de enzima conxugada a cada pozo, cubrir a placa e incubar a 37 graos durante 45 minutos.

④ Apen a película de placa de selado, axita a solución na placa ben, engade 300 µL de lavado de concentración de traballo a cada pozo e logo descarta o líquido no pozo. Repita os pasos anteriores 5 veces e, finalmente, seca nun papel absorbente limpo.

⑤ADD Solución de substrato de 100 µl a cada pozo, cobre a placa e incuba durante 10 minutos a 37 graos lonxe da luz.

⑥ADD Solución de parada de 50 µL a cada pozo e determina o resultado dentro de 5 minutos.

 

Paso 2 Interpretación de resultados

 

O valor OD450 de cada pozo foi lido no lector de microplacas de 96 pozos.

2.1 Validación

O valor medio de OD450nm do control negativo foi<0.1 and the average OD450nm value of positive control /the average OD450nm value of negative control was ≥3, the experimental results were valid. Otherwise, the test should be repeated.

2.2 Método de cálculo

Para cada mostra, calcula o S/P do seguinte xeito usando a mostra corrixida e os valores de control:

2.3 Interpretación de resultados

Cando S/P.<0.25, it is judged as negative.

Cando S/P é superior ou igual a 0,35, xulga como positivo.

Cando 0,25 menos ou igual a S/P<0.35, it is judged as suspicious, and suggest to repeat sampling and test one week later.

 

Etiquetas en quente: BOVINO VIRAL VIRAL VIRREA VIRUS KIT ELISA, China BOVINO VIRAL VIRAL VIRREA VIRO